Seahorse检测时将细胞培养在专用的微孔板上，实时检测加入不同药物后的耗氧率（O2 consumption rate，OCR）和胞外酸化率（extracellular acidification rate，ECAR），来表征细胞的代谢状况。其中OCR由线粒体电子传递造成，ECAR则源自乳酸发酵（糖酵解酸化）和线粒体产生的二氧化碳（线粒体酸化）。

OCR用来研究线粒体氧化磷酸化功能。检测时一般先测定正常状态下的基础呼吸（basal respiration），然后加入寡霉素（oligomycin）抑制ATP合酶，这是OCR显著下降，仅余下质子渗漏（proton leak）造成的耗氧率。降低部分即为氧化磷酸化的耗氧率（ATP production）。